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二手液相 岛津液相色谱仪的日常应用维护
2012-06-01 [1925]

二手液相 岛津液相色谱仪的日常应用维护

一 、岛津掖相色谱仪的日常分析注意事项
1.关于试剂
试剂类别:有机溶剂 无机化合物 水
试剂的要求:(1)有机溶剂的级别HPLC以上专用试剂。
(2)无机化合物要求分析纯以上。
(3) 水要求是去离子纯净水。
2.流动相
要求: (1)无气泡,通过超声脱气,通氦气等方法进行脱气。
(2)纯净无杂质,常用方法为用0.45微孔过滤膜进行过滤。
3. ODS柱的注意事项
(1) 压力 注意每根柱的耐压(zui大使用压力)。
(2) PH的范围 不同柱子的PH值范围有所不同。
(3) 清洗 柱子需要必要的清洗,请用户参考柱子的说明书。
(4) 保存 长时间不使用柱子时需要合适的试剂进行保存,请参考柱子的说明书。
4. 样品的注入方式及进样量
(1)注入方式 在INJ位置将进样针插入,然后再将手柄扳到Load位,在Load位时将样品匀速推入定量环,在从Load位扳到INJ位置即完成进样过程。
(2)进样量 对于20微升定量环,进样量20微升以下,5微升以上可用微量注射针进样(看刻度)。5微升以下可能回会造成样品重复性变差。20 微升以上(利用定量环)建议用户注射量为定量环的3倍以上,即大于60微升。
以上建议主要是减少进样误差,提高重复性。
5. 检测器的背压及各种检测池的耐压
(1)紫外检测器 耐压< 30kg/cm2f
(2)检测器荧光 耐压< 30kg/cm2f
(3)示差检测器 耐压< 30kg/cm2f
检测器后面加一些背压主要目的是防止气泡滞留在检测器中。

二、液相色谱的常见故障及排除方式
1、        关于吸滤过滤器堵塞
现象: 塞吸现象、管路中不断产生气泡
处理方式:将吸滤头1从溶剂管中拔出,放在正己烷
或稀硝酸(一般<10%)中超声清洗。
2、        在线过滤器堵
现象: 不连接柱子及管路、混合器(松开泵进混合器或柱子的管路接头),设定泵流速为1ml/min,泵压力大于0.3MPa,说明在线过滤器堵。
处理方式: 一般建议用户更换新的过滤器,仪器型号:LC-10ADVP, LC-10ATVP, LC-20A,LC-20AD, LC-10AT, LC-8A, LC-6AD等可以将在线过滤器拆下,用稀硝酸(浓度小于10%),进行超声清洗。
3、        压力波动的原因及处理方法
产生波动的原因: 有气泡
密封圈有磨损,产生微量的泄液
进口单向阀中有异物(较常见)
在线过滤器,管路,柱子进口处有盐析出或杂物
处理方法: 流动相进行脱气,排除流路中的气泡
更换密封圈
清洗进出口单向阀,将单向阀置于烧杯中,用异丙醇进行超声清洗
检查并清洗过滤器及流路
4、        混合器堵及解决方法
双泵高压梯度系统有高压混合器,长时间使用后会产生不同程度的内部过滤器堵。
处理方法:
(1)先把混合器的预混合腔整体拆下,再拆下1号和2号处。
(2)建议用户不可拆开2号和3号之间的连接。
(3)取出混合器内部的过滤器5-1。
(4)将过滤器置于稀硝酸中进行超声清洗。
5、引起柱压升高的原因
色谱柱长时间使用后用户发现柱压比以往要高出许多,造成此情况可能由以下几个因素引起。
(1)        在线过滤器堵。
(2)        高压混合器堵。
(3)        进样器堵。
(4)        流路中部分细管堵。
(5)        流通池堵
(6)        柱子内部吸附样品产生堵
确认发法:进行分段检测,确认的确是柱子压力高还是以上5点原因中某个引起的。
6、进样峰分叉的原因
A)        流路及柱子等没有做任何改变的情况下,分析样品时,被检测峰产生分叉,则说明保护柱或分析柱柱效下降,需再生保护柱或分析柱。
B)        柱的出口到检测池的管路偏长或管路内径宽所致(常用内径0.3mm以下),导致样品扩散,造成峰分叉。
7、        什么情况下需更换D2 Lamp
A)        在SPD-10A, SPD-10Avp,SPD-20A上查看参比池的能量,若能量值(REF EN )偏低(220nm时),一般在400以下,则被认为需要更换氘灯。
B)        显示D2 Lamp ERROR时,一般情况下认为氘灯不良需更换。
C)        氘灯超过使用时间(zui多2000小时),需要更换氘灯。
8、        造成检测池能量低的原因
A.        氘灯使用时间过长(大于2000小时),灯老化所致
B.        光路系统受到污染或老化
说明:检测池能量高低以参比池为准。
9、        检测池中有气泡如何排除
1一般情况下,很小的气泡会停留在检测池中,所以需要在池管路出口1处加一个背压管,池中气泡不易在池中产生。(加背压:出口处加上一段阻尼管增加压力)

10、        如何清洗流通池
一般情况下,请用户不要将池拆散,而是用仪器附带的工具进行清洗。 常用流程:水-----甲醇-----异丙醇-----甲醇,或再用稀硝酸冲洗池流路。
11、        基线漂移,噪音增大的原因。
1、        所用试剂不纯
2、        整个流路系统不干净
3、        流动池污染
4、        氘灯使用时间过长
5、        电压不稳,或者有环境干扰
6、        柱子污染等因素
12、        梯度洗脱时可能产生的干扰峰
在进行梯度洗脱时,由于溶剂的变化,导致吸光度背景值的该改变。所以会产生基线上下波动,这是正常现象。由于不断的洗脱。特别是水及无机盐混合的流路,流过柱子后部分杂质被柱子吸附,随着体系洗脱液极性的变化,以及在不同的检测波长下,某些成分被检测,导致在没有进样情况下,基线上出现峰,即被认为干扰峰。
13、        ODS柱的再生
ODS柱子使用一段时间后可能会导致柱效下降,此时需要对柱子进行再生,提高柱效。
1.        甲醇冲洗半小时
2.        三氯甲烷冲洗十分钟
3.        异丙醇冲洗十分钟
4.        三氯甲烷冲洗十分钟
5.        甲醇冲洗半小时
说明:柱使用时间的长短与被分离的样品有很大的关联,所以碰到像生物样品、血制品、发酵产品等中均含有不同程度的蛋白质及大分子量的组分,柱子很容易损坏,柱效易下降。这种情况下用以上方式进行再生几乎没有明显的改变。
 

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