首页 > 技术文章 > HPLC-ELSD测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量
HPLC-ELSD测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量
2011-11-10 [1986]

摘要

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。春秋两季采挖,除去须根及根头,晒干。由于来源、产地、处理方式的不同,会导致黄芪的质量完全不同,从而直接影响其药用价值,因此必须建立一套完整的质量控制方法。

内容

HPLC-ELSD检测方法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量

 

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)

Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春秋两季采挖,除去须根及根头,晒干。

由于来源、产地、处理方式的不同,会导致黄芪的质量完全不同,从而直接影响其药用价值,因此必须建立一套完整的质量控制方法。

一、实验过程

1.1 仪器

ELSD MODEL 200  SofTA Coporation

  液相系统:泵

  工作站:色谱采集系统

1.2 试剂

乙腈:色谱纯

  :纯净水

甲醇:色谱纯

黄芪甲苷对照品;黄芪注射液;黄芪阴性试剂

1.3 色谱系统及ELSD参数

  色谱柱:C18    250×4.6mm

流动相:乙腈:水(3268

流速:1.00 mL/min

ELSD参数: DF=60℃SC=30℃

www.lc-gc.com为您提供。

下图为在上述色谱条件下测定的黄芪对照品与黄芪注射液ELSD色谱图:

1.4 曲线方程及线性关系

取对照品溶液配制成0.10.30.50.71mg/mL的溶液,以浓度对数值为横坐标,以峰面积对数值为纵坐标作回归,方程为:y=1.48528x+2.26890r2=0.9997,进样量为20μL(满环进样,浓度在0.1-1mg/mL呈良好的线性关系。

1.5 系统适应性实验

取供试品溶液2.0mL,按上述色谱条件,满环进样20μL,黄芪甲苷的保留时间为9.5min左右,理论塔板数不低于10000,托尾因子为1.06左右,分离度不小于5.0

1.6样品的含量测定

分别取黄芪注射液三批,按上述色谱条件,满环进样20μL。测定结果见表1

1样品中黄芪甲苷的含量测定

 

 

批号

含量mg

0509101

2.35

0509103

1.98

0509105

2.17

 

二、讨论

ELSD主要用于没有紫外吸收或为紫外末端弱吸收的样品,或流动相有紫外吸收干扰或梯度洗脱时基线漂移影响测定;ELSD检测,流动相在漂移管便气化蒸发,不影响样品检测。

黄芪甲苷是黄芪为原料的中药制剂的主要质量控制指标。其含量测定方法有薄层色谱、HPLC—紫外放,采用ELSD作为检测器—HPLC法也已见报道,但都存在样品前处理复杂、色谱干扰多且干扰成分大等缺点。

由于ELSD本身的响应特性,黄芪甲苷浓度与其峰面积值并不呈线性,而将浓度与峰面积同时取以10为底的对数后可在一定范围内(0.11mg/ml)得到理想的线性关系(r2=0.9997)。