首页 > 技术文章 > 聊聊液相色谱仪使用时的疑难杂症
聊聊液相色谱仪使用时的疑难杂症
2022-12-21 [131]
  气相色谱只能分析在工作温度下可以蒸发而不会分解的物质。高沸点化合物,非挥发性物质,热不稳定化合物,离子化合物和聚合物的分离和分析是困难的。因此,其应用受到一定程度的限制。据统计,只有约20%的有机物可以通过气相色谱分析。液相色谱仪不受样品挥发性和热稳定性的限制,非常适合大分子量和难以气化。分离和分析不易挥发或对热,离子化合物和聚合物敏感的物质,占有机物质的约70-80%。
 
  液相色谱仪的常见故障及解决方法:
 
  1.柱压原因
 
  (1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;
 
  (2)样品污染沉积。处理对于第种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。[1]
 
  2.气泡溢出
 
  流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
 
  3.既无压力指示,又无液体流过
 
  (1)泵密封垫圈磨损;
 
  (2)大量气泡进入泵体。处理对于第种情况,更换密封垫圈;对于第种情况,在泵作用的同时,用个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
 
  4.压力波动大,流量不稳定
 
  原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。